細胞支原體污染PCR檢測試劑盒

產地:美國Southern Biotech Associates,Inc. （SBA）

產品信息：

產品特點：

• 用于特異性檢測細胞培養液中支原體的污染
• 用于擴增支原體基因組中16S rRNA編碼區
• 特殊的引物設計擴增用于覆蓋支原體的三大類（Mycoplasma,Acholeplasma and Ureaplasma）,因此可檢測超過95%的潛在的細胞污染。
• 檢測方法簡單，3小時內出結果。
• 檢測靈敏度高：可檢測到100ul細胞上清液中2-5毫微微克的支原體DNA。
• 特異性高，只擴增細胞培養液中支原體DNA，而真核細胞和細菌的DNA被擴增。
• 試劑盒帶有陽性對照用于驗證PCR體系的穩定性。
• 試劑盒內帶有內參對照，用于排除PCR抑制劑引起的假陰性。

試劑盒用于擴增的支原體種屬及對應PCR產物對照片段

結果分析：

• 細胞如被支原體污染，可擴增到448-611bp一條或多個條帶
• 樣本中包含內參的DNA將會擴增出270bp的PCR片段（見圖，泳道7），該擴增表明實驗系統可靠性。
• 如在一些樣品中擴增不到內參(270bp)，這種情況下可設置陰性對照（樣本為水），可擴增到270bp的條帶。
• 如果樣品中含有PCR的抑制劑，可通過DNA提取去除。
• 如果細胞發生嚴重的支原體污染，448-611bp擴增產物將聚集或270bp的內參將消除（見圖，泳道6）
• 低于100bp的低濃度片段，表明是二聚體或非特異性片段，而非陽性結果，這種情況不影響檢測結果的精度。

檢測結果示例：

Lane1:大腸桿菌基因組擴增結果   Lane2:雜交瘤細胞DNA擴增結果

Lane3:陰性對照（水）           Lane4:陽性對照

Lane5:抑制劑樣本               Lane6:嚴重支原體污染的細胞

Lane7:輕度支原體污染的細胞     Lane8:100bp DNA ladder